Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gel electrophoresis jẹ ilana ipilẹ ni awọn ile-iṣere kọja awọn ilana ẹkọ ti ibi, gbigba iyapa ti awọn macromolecules bii DNA, RNA ati awọn ọlọjẹ.Awọn media ipinya oriṣiriṣi ati awọn ọna ṣiṣe ngbanilaaye awọn ipin ti awọn ohun elo wọnyi lati pinya ni imunadoko nipa lilo awọn abuda ti ara wọn.Fun awọn ọlọjẹ ni pato, polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) nigbagbogbo jẹ ilana ti yiyan.
PAGE jẹ ilana ti o yapa awọn macromolecules gẹgẹbi awọn ọlọjẹ ti o da lori iṣipopada elekitirophoretic wọn, iyẹn ni, agbara awọn atunnkanka lati lọ si ọna elekiturodu ti idiyele idakeji.Ni PAGE, eyi ni ipinnu nipasẹ idiyele, iwọn (iwuwo molikula) ati apẹrẹ ti moleku.Awọn atupale gbe nipasẹ awọn pores ti a ṣẹda ni gel polyacrylamide.Ko dabi DNA ati RNA, awọn ọlọjẹ yatọ ni idiyele ni ibamu si awọn amino acids ti o dapọ, eyiti o le ni agba bi wọn ṣe nṣiṣẹ.Awọn gbolohun ọrọ Amino acid le tun ṣe awọn ẹya ile-keji ti o ni ipa lori iwọn ti o han gbangba ati nitori naa bawo ni wọn ṣe le gbe nipasẹ awọn pores.Nitorinaa o le jẹ iwunilori nigbakan si awọn ọlọjẹ denature ṣaaju si electrophoresis lati laini wọn ti o ba nilo idiyele deede diẹ sii ti iwọn.
SDS OJU
Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis jẹ ilana ti a lo lati ya awọn ohun elo amuaradagba ti ọpọ eniyan 5 si 250 kDa.Awọn ọlọjẹ ti ya sọtọ nikan lori ipilẹ iwuwo molikula wọn.Sodium dodecyl sulfate, ẹya anionic surfactant, ti wa ni afikun ni igbaradi ti awọn gels ti o boju awọn idiyele inu ti awọn ayẹwo amuaradagba ati fun wọn ni idiyele ti o jọra si ipin pupọ.Ni awọn ọrọ ti o rọrun, o denatures awọn ọlọjẹ ati fun wọn ni idiyele odi.
EWE abinibi
PAGE abinibi jẹ ilana ti o nlo awọn gels ti kii ṣe denatured fun iyapa awọn ọlọjẹ.Ko dabi SDS PAGE, ko si oluranlowo denaturing ti wa ni afikun ni igbaradi ti awọn gels.Bi abajade, iyapa ti awọn ọlọjẹ waye lori ipilẹ idiyele ati iwọn awọn ọlọjẹ.Ninu ilana yii, iyipada, kika ati awọn ẹwọn amino acid ti awọn ọlọjẹ jẹ awọn nkan ti ipinya da lori.Awọn ọlọjẹ ko bajẹ ninu ilana yii, ati pe o le gba pada lẹhin ipari iyapa.
Bawo ni polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ṣiṣẹ?
Ilana ipilẹ ti PAGE ni lati ya awọn atupale nipasẹ gbigbe wọn nipasẹ awọn pores ti gel polyacrylamide nipa lilo itanna lọwọlọwọ.Lati ṣe aṣeyọri eyi, acrylamide –bisacrylamide mix jẹ polymerized (polyacrylamide) nipasẹ afikun ammonium persulfate (APS).Idahun naa, eyiti o jẹ catalyzed nipasẹ tetramethylethylenediamine (TEMED), ṣe apẹrẹ apapọ kan pẹlu awọn pores nipasẹ eyiti awọn atunnkanka le gbe (Aworan 2).Iwọn ti o ga julọ ti acrylamide lapapọ ti o wa ninu gel, ti o kere si iwọn pore, nitorinaa kere awọn ọlọjẹ ti yoo ni anfani lati kọja.Ipin ti acrylamide si bisacrylamide yoo tun ni ipa iwọn pore ṣugbọn eyi nigbagbogbo jẹ igbagbogbo.Awọn iwọn pore kekere tun dinku iyara ni eyiti awọn ọlọjẹ kekere ni anfani lati gbe nipasẹ gel, imudarasi ipinnu wọn ati idilọwọ wọn lati ṣiṣẹ ni pipa sinu ifipamọ ni iyara nigbati o ba lo lọwọlọwọ.
Ohun elo fun Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gel Electrophoresis Cell (Taki/Iyẹwu)
Ojò gel fun polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) yatọ si ojò gel agarose.Ojò gel agarose jẹ petele, lakoko ti ojò PAGE jẹ inaro.Nipa inaro cell electrophoresis (ojò / iyẹwu), jeli tinrin (deede 1.0mm tabi 1.5mm) ti wa ni dà laarin meji gilasi farahan ati ki o agesin ki isalẹ ti jeli ti wa ni submerged ni ifipamọ ninu ọkan iyẹwu ati awọn oke ti wa ni submerged ni saarin. ni iyẹwu miiran.Nigbati o ba lo lọwọlọwọ, iwọn kekere ti ifipamọ n lọ nipasẹ gel lati iyẹwu oke si iyẹwu isalẹ.Pẹlu awọn dimole ti o lagbara lati ṣe iṣeduro awọn iduro ijọ ni ipo titọ, ohun elo ṣe irọrun awọn ṣiṣe gel yiyara pẹlu paapaa itutu agbaiye ti o mu abajade awọn ẹgbẹ ọtọtọ.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd.Awọn awoṣe DYCZ-20C ati DYCZ-20G jẹ awọn sẹẹli elekitirophoresis inaro (awọn tanki / awọn iyẹwu) fun itupalẹ ilana ilana DNA.Diẹ ninu awọn sẹẹli elerophoresis inaro (awọn tanki / awọn iyẹwu) ni ibamu pẹlu eto fifọ, bii awoṣe DYCZ-24DN, DYCZ-25D ati DYCZ-25E ni ibamu pẹlu awoṣe eto Blotting Western DYCZ-40D, DYCZ-40G ati DYCZ-40F. eyiti a lo fun gbigbe moleku amuaradagba lati inu gel si awo awọ.Lẹhin SDS-PAGE electrophoresis, Western Blotting jẹ ilana kan lati ṣawari amuaradagba kan pato ninu idapọ amuaradagba kan.O le yan awọn ọna ṣiṣe didi wọnyi ni ibamu si awọn ibeere idanwo.
Electrophoresis Power Ipese
Lati pese ina fun ṣiṣe jeli, iwọ yoo nilo ipese agbara eleto-ẹrọ.Ni Liuyi Biotechnology a pese ọpọlọpọ awọn ipese agbara electrophoresis fun gbogbo awọn ohun elo.Awoṣe DYY-12 ati DYY-12C pẹlu foliteji iduroṣinṣin giga ati lọwọlọwọ le pade elekitirophoresis ibeere foliteji giga.O ni iṣẹ ti iduro, akoko, VH ati ohun elo igbese-nipasẹ-igbesẹ.Wọn jẹ apẹrẹ fun IEF ati DNA sequencing electrophoresis ohun elo.Fun amuaradagba gbogbogbo ati ohun elo electrophoresis DNA, a ni awoṣe DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, ati bẹbẹ lọ, eyiti o tun jẹ awọn ipese agbara tita to gbona pẹlu awọn sẹẹli electrophoresis (awọn tanki / awọn iyẹwu).Awọn wọnyi le ṣee lo fun aarin ati kekere foliteji electrophoresis ohun elo, gẹgẹ bi awọn fun ile-iwe laabu lilo, iwosan lab ati be be lo.Awọn awoṣe diẹ sii fun awọn ipese agbara, jọwọ ṣabẹwo si oju opo wẹẹbu wa.
Aami Liuyi ni diẹ sii ju itan-akọọlẹ ọdun 50 ni Ilu China ati pe ile-iṣẹ le pese awọn ọja iduroṣinṣin ati didara julọ ni gbogbo agbaye.Nipasẹ idagbasoke ọdun, o yẹ fun yiyan rẹ!
Fun alaye diẹ sii nipa wa, jọwọ kan si wa nipasẹ imeeli[imeeli & # 160; or [imeeli & # 160;.
Awọn itọkasi fun Kini polyacrylamide gel electrophoresis?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis, Bi o ṣe Nṣiṣẹ, Awọn iyatọ Imọ-ẹrọ, ati Awọn ohun elo Rẹ
Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Karun-23-2022