Idanwo fun yiya sọtọ amuaradagba omi ara nipasẹ Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis

Ilana

Cellulose acetate film electrophoresis jẹ ọna electrophoresis nipa lilo fiimu acetate cellulose bi atilẹyin.Iṣẹlẹ ninu eyiti awọn patikulu ti o gba agbara gbe si ọna elekiturodu idakeji labẹ iṣẹ ti aaye ina ni a pe ni electrophoresis.Niwọn igba ti amuaradagba kọọkan ni aaye isoelectric kan pato, ti a ba gbe amuaradagba sinu ojutu kan pẹlu pH kekere ju aaye isoelectric rẹ, amuaradagba yoo gba agbara daadaa ati gbe si elekiturodu odi.Ni ilodi si, o lọ si ọpa rere.Nitoripe iyara awọn ohun elo amuaradagba gbigbe ni aaye ina mọnamọna ni ibatan si idiyele wọn, apẹrẹ ati iwọn awọn ohun elo, awọn ọlọjẹ oriṣiriṣi le niya nipasẹ electrophoresis.Omi ara ni ọpọlọpọ awọn ọlọjẹ, gbogbo eyiti o ni awọn aaye isoelectric ni pH7.5 tabi kere si.Nigbati a ba gbe omi ara sinu pH 8.6 saarin lati ṣiṣẹ electrophoresis, gbogbo awọn ọlọjẹ omi ara ti gba agbara ni odi ati pe yoo lọ si ẹgbẹ rere ni aaye ina.Niwọn bi ọpọlọpọ awọn ọlọjẹ omi ara ni awọn idiyele oriṣiriṣi ni pH kanna, awọn patikulu molikula yatọ ni iwọn, ati nitorinaa iyara ijira yatọ, ati pe wọn pin nipasẹ electrophoresis.Awọn aaye isoelectric ati awọn iwuwo molikula ti awọn ọlọjẹ ara ni a fihan ninu tabili ni isalẹ:

Amuaradagba

Awọn aaye isoelectric(PI)

Ìwúwo molikula

Albumin

4.88

69 000

α1-gloulin

5.00

200 000

α2-gloulin

5.06

300 000

β-gloulin

5.12

9 000 ~ 150 000

γ-gloulin

6.85 ~ 7.50

156 000 ~ 300 000

1

Idanwo naa ni lati ya awọn ọlọjẹ ti o yatọ si ninu omi ara pẹlu cellulose acetate membrane (abbr. CAM) gẹgẹbi media atilẹyin.CAM jẹ iru foamed loosefiimu pẹlu aṣọ aṣọ to dara, ati sisanra jẹ 0.1mm-1.5mm, eyiti o ni gbigba omi kan.

Awọn ohun elo, awọn ohun elo ati awọn reagents fun CAM Electrophoresis

Awọn apẹẹrẹ:ni ilera eda eniyan omi ara

Irinse:ipese agbara DYY-6C, electrophoresis ojò DYCP-38C, superior sample ikojọpọ WD-9404

1-4

Awọn reagents

1) cellulose acetate awo 7X9cm

2) PH 8.6 barbitol ojutu ojutu (ionic agbara 0.05-0.09, o jẹ 0.06tid akoko.): Ya 1,84g Diethyl barbituric acid, ati ki o si mu 1.03g Diethyl sodium pentobarbital, fi diẹ ninu awọn distilled omi lati ooru lati tu, ki o si ṣe. to 1000 milimita;

3) Abariwon: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, fi omi distilled 100ml;

4) TBS / T tabi PBS / T: 45ml 95% ethanol, 5ml glacial acetic acid, fi 50ml distilled omi;

5) Solusan mimọ: 70ml anhydrous ethanol, 30ml glacial acetic acid.

Ọna idanwod

1) Ṣetan awọ ara: Fi awọ ara sinu ibi ifunmọ barbitol 30min-8h, ki o mu jade, yọ ojutu afikun nipasẹ iwe ifamọ.

2) Awọn ayẹwo ikojọpọ: Ṣe iyatọ si ẹgbẹ ti o ni inira ati ẹgbẹ didan ti awo ilu, ki o samisi laini kan ni ijinna 1.5cm si opin oke ni ẹgbẹ ti o ni inira.Fifuye awọn ayẹwo nipa superior ayẹwo ikojọpọ ọpa lori awọn ti o ni inira ẹgbẹ.Akiyesi: Awọn ayẹwo yẹ ki o wa ni ti kojọpọ lori ẹgbẹ inira ti awo ilu.Lẹhin ti awọn ayẹwo omi ara ti wa ni kikun sinu awo ilu, tan-an tanna, fi ẹgbẹ ti o ni inira (pẹlu awọn ayẹwo) koju si isalẹ si ojò, ati ipari pẹlu awọn ayẹwo ni a gbe sinu elekiturodu odi.

3) Electrophoresis: Tan ipese agbara, 0.40.6m A / cm awo ilu, akoko ṣiṣe jẹ 30-45 min.Lẹhin ti nṣiṣẹ electrophoresis, pa agbara naa.

4) Awọ ati mimọ: Mu awọ ara ilu jade lati inu ojò, ki o si bọmiit sinu ojutu dye fun iṣẹju 5, lẹhinna sọ di mimọ ni ojutu mimọ leralera fun awọn akoko 3-4 titi awọ abẹlẹ yoo fi han.Awọn ọlọjẹ omi ara yẹ ki o han lori awọn ẹgbẹ, ati ni deede awọn agbegbe marun wa, ṣe agbekalẹ opin oke si laini ti a samisi, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.

5) Itoju: fi elecrtophoresis ti o gbẹẹgbẹni ojutu mimọ fun awọn iṣẹju 10-15, lẹhinna mu jade ki o fi wọn sori gilasi mimọ, lẹhin ti o gbẹ, yoo di fiimu ti o han gbangba.ẹgbẹ.

IdanwoAbajade

1-3

Ipa Iyapa ti awọn ayẹwo omi ara dara, ati pe ko si lasan iru ẹgbẹ.Awọn atunṣe ti awọn abajade yatọ nitori awọn ilana idanwo ati awọn ọna ti oludaniloju, ati pe atunṣe jẹ giga.

Ipari

Eto wiwa elekitirophoresis ile-iwosan iyara (Electrophoresis ojòDYCP-38C,ibi ti ina elekitiriki ti nwaDYY-6C ati ikojọpọ apẹẹrẹ ti o ga julọ WD-9404) ti a ṣe nipasẹ waIle-iṣẹ Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdpade awọn ibeere idanwo,atiawọn esi ti wa ni reproducible, o rọrun ati ki o yara, o dara funẹkọiwadi.

Beijing LiuyiBiotechnology Co., Ltd amọja ni iṣelọpọ awọn ọja electophoresis fun ile-iṣẹ imọ-jinlẹ igbesi aye, eyitini diẹ sii ju 50-odun itan ni China ati awọn ile-le pese idurosinsin ati ki o ga-didara awọn ọja gbogbo ni ayika agbaye.Nipasẹ awọn ọdun ti idagbasoke, o yẹ fun yiyan rẹ!

A n wa awọn alabaṣepọ ni bayi, mejeeji OEM electrophoresis ojò ati awọn olupin ni a ṣe itẹwọgba.

Fun alaye diẹ sii nipa wa, jọwọ kan si wa nipasẹ imeeli[imeeli & # 160;tabi[imeeli & # 160;.


Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu kọkanla-14-2022