Awọn ilana ipilẹ ti Agarose Gel Electrophoresis (1)

1. Iyasọtọ

Gel electrophoresis ti pin si awọn oriṣi inaro (pẹlu awọn gels ọwọn ati awọn gels pẹlẹbẹ) ati awọn iru petele (nipataki awọn gels pẹlẹbẹ) (Aworan 6-18). Ni gbogbogbo, iyapa inaro jẹ diẹ ti o ga ju petele, ṣugbọn igbaradi gel petele ni o kere ju awọn anfani mẹrin: atilẹyin wa labẹ gbogbo gel, gbigba lilo agarose ifọkansi kekere; o ṣee ṣe lati mura awọn abọ gel agarose ti awọn pato pato; igbaradi gel ati ikojọpọ ayẹwo jẹ diẹ rọrun; iyẹwu electrophoresis jẹ rọrun lati kọ ati iye owo-doko. Niwọn igba ti a ti ṣe elekitirophoresis petele pẹlu awo agarose jeli ti o wa ni isalẹ ni kikun nipa 1mm ni isalẹ dada ti saarin electrophoresis, o tun pe ni electrophoresis submerged.

图片2

Electrophoresis Tank DYCP-31DN fun agarose jeli electrophoresis

2.Buffer System

Ni nucleic acid Iyapa, julọ awọn ọna šiše gba lemọlemọfún awọn ọna šiše. Awọn buffer electrophoresis ti o wọpọ pẹlu TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L boric acid, 0.0024mol/L EDTA) ifipamọ ati THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L iṣuu soda acetate, 0.0018mol/L EDTA) ifipamọ. Awọn buffer wọnyi ni a pese sile ni gbogbogbo bi awọn ojutu ọja 10x ati fomi si ifọkansi ti a beere nigba lilo. Awọn oṣuwọn ijira ti laini ati DNA ipin ninu gel agarose yatọ pẹlu ifipamọ ti a lo. Ninu ifipamọ, iwọn iṣiwa ti DNA laini tobi ju ti DNA ipin lọ, lakoko ti o wa ninu ifipamọ TBE, idakeji jẹ otitọ.

3

3.Igbaradi ti Agarose Gel

(1) Igbaradi ti Horizontal Agarose Gel

(a) Mura ifọkansi ti a beere fun ti gel agarose nipa lilo ifipamọ elekitirophoresis 1x.

(b) Gún agarose náà láti parí ìtújáde yálà nínú iwẹ̀ omi gbígbóná, lórí ẹ̀rọ oníná, tàbí nínú microwave. Tutu ojutu agarose si 55°C ki o ṣafikun ethidium bromide (EB) dye si ifọkansi ikẹhin ti 0.5 μg/ml.

(c) Di awọn egbegbe ti gilasi tabi awọn akiriliki pẹlu iye kekere ti gel agarose, ṣafikun comb, ki o si gbe awọn eyin comb ni iwọn 0.5 ~ 1.0 mm loke awo naa.

(d) Tú awọn yo o agarose jeli ojutu continuously sinu gilasi tabi akiriliki awo m (sisanra da lori awọn iwọn didun ti awọn DNA ayẹwo), etanje awọn ifihan ti air nyoju. Jẹ ki o ṣinṣin nipa ti ara ni iwọn otutu yara.

(e) Fara yọ comb lẹhin imuduro pipe. Ṣafikun iye ti o yẹ ti ifipamọ elekitirophoresis si ojò jeli, ni idaniloju pe awo gel ti wa ni abẹlẹ ni iwọn 1 mm ni isalẹ aaye ti saarin electrophoresis.

(2) Igbaradi ti inaro Agarose jeli

(a) Yọ girisi tabi iyokù kuro ninu awọn awo gilasi nipasẹ fifọ pẹlu ethanol.

(b) Gbe awọn apẹrẹ alafo laarin awọn dams iwaju ati ẹhin, so awọn egbegbe ti awọn apẹrẹ spacer pọ mọ iwaju ati sẹhin, ki o si fi wọn pamọ pẹlu awọn dimole.

(c) Ṣafikun 2% agarose ni ifipamọ 1x laarin awọn egbegbe ti awọn apẹrẹ spacer lati ṣe pulọọgi agarose giga 1 cm ni isalẹ ti iyẹwu simẹnti jeli.

(d) Tú jeli agarose ti o yo ni ifọkansi ti o fẹ, ti a pese sile ni ifipamọ 1x, sinu iyẹwu gel soke si 1 cm ni isalẹ oke.

(e) Fi comb sii, yago fun didamu awọn nyoju afẹfẹ labẹ awọn eyin comb. Nigbakuran, awọn wrinkles le han ni awọn eyin comb nigba itutu jeli agarose; ni iru awọn igba miran, nìkan fi diẹ ninu awọn yo o agarose ni oke lati fi idi rẹ.

(f) Yọ comb. Lati ṣe idiwọ jijo ifipamọ ninu iho ikojọpọ, di asopọ laarin awo gel agarose ati iyẹwu electrophoresis pẹlu 2% agarose ki o ṣafikun iye ifipamọ ti o nilo.

(g) Ṣafikun ifipamọ elekitirophoresis 1x si iyẹwu jeli.

(h) Fara balẹ gbe awọn ayẹwo DNA sori gel agarose nisalẹ ifipamọ naa.

3

Alaye diẹ sii nipa imọ ipilẹ nipa agarose gel electrophoresis, a yoo pin ni ọsẹ to nbọ. Fẹ alaye wọnyi jẹ iranlọwọ si idanwo rẹ.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ti ṣe amọja ni iṣelọpọ awọn ohun elo elekitirophoresis fun diẹ sii ju ọdun 50 pẹlu ẹgbẹ imọ-ẹrọ ọjọgbọn tiwa ati ile-iṣẹ R&D. A ni igbẹkẹle ati laini iṣelọpọ pipe lati apẹrẹ si ayewo, ati ile itaja, ati atilẹyin titaja. Awọn ọja akọkọ wa ni Electrophoresis Cell (ojò / iyẹwu), Ipese Agbara Electrophoresis, Transilluminator LED Blue, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System etc.

A n wa awọn alabaṣepọ ni bayi, mejeeji OEM electrophoresis ojò ati awọn olupin ti wa ni tewogba.

Ti o ba ni ero rira eyikeyi fun awọn ọja wa, jọwọ ma ṣe ṣiyemeji lati kan si wa. O le fi ifiranṣẹ ranṣẹ si wa ni imeeli[imeeli & # 160;tabi[imeeli & # 160;, tabi jọwọ pe wa ni +86 15810650221 tabi ṣafikun Whatsapp +86 15810650221, tabi Wechat: 15810650221.

Jọwọ ṣe ọlọjẹ koodu QR lati ṣafikun lori Whatsapp tabi WeChat.

2


Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu kejila-07-2023